51黑料门今日黑料

 【预期用途】
本试剂盒主要目的是测定猪血清中猪蓝耳病毒抗
体，可用于评估感染猪的血清学诊断以及猪蓝耳病毒
疫苗免疫状况分析。

【检验原理】
本试剂盒应用固相酶联免疫吸附试验（ELISA）
原理，由包被有高纯度的猪蓝耳病毒抗原的微孔反应
板、辣根过氧化物酶标记的抗猪 IgG 及其它试剂配套
组成。其反应机理为包被抗原与样本中的 PRRSV-Ab
结 合 ， 再 与 酶 标 抗 猪 IgG 抗 体 形 成 “ 包 被 抗 原
+PRRSV-Ab+酶标抗猪 IgG 抗体"复合物，加入显色剂，
通过酶催化反应显色。显色深浅与 PRRSV-Ab 的量成
正比，当样本反应显色后，经酶标仪检测所得结果超
过设定的临界值时结果判为阳性，即表明免疫产生了
抗体或有自然感染存在。

【自备器材】
1．酶标仪，双波长 450/630 nm 滤光片
2．微量移液器（单道 10-100 μ濒、0.5-10 μ濒、多道 30-300
μ濒）
3．水浴箱或恒温箱
4．微量振荡器
5．一次性枪头（10 μ濒，200 μ濒）
6．去离子水

【样本要求】
1．本试剂检测的样本为猪血清，样本应无菌采集，2 ℃
－8 ℃贮存应不超过一周，长期应在－20℃以下保存。
2．避免使用严重溶血、有沉淀物、含悬浮纤维蛋白及
污染长菌的血清样本。

【实验准备】
1．试剂盒组分回温平衡:试剂盒组分在实验前，先取
出置室温 30 min，可以获得最佳结果。
2．样本稀释：用试剂盒提供的样本xishi液将样本作
40 倍稀释（例:将 5 μ濒 样本加至 195 μ濒 样本xishi液中）。
3．配制洗涤液：将试剂盒所提供浓缩洗涤液直接用去
离子水稀释 10 倍（例：将 10 ml 洗涤液加入 90 ml 去
离子水中）。若 10 倍浓缩洗涤液出现结晶，属正常现
象，放置 37 ℃至溶解后即可。

【检验方法】
1. 加样：根据样本数量，取所需板条，检测时，设阴、
阳性对照各 2 孔，分别加入不用稀释的阴、阳性对照
血清 100 μ濒 于相应孔中（可不设空白对照）。其余为
样本孔，每孔加 100 μ濒 用样本xishi液稀释好的样本。
2. 温育：加样后，盖上盖板膜，置 37 ℃温育 30 min。
3. 洗板：甩去孔内液体，用洗涤液注满反应板孔，静
置 10 s，直接甩出，洗涤 3 次，最后一次洗涤后吸干
板内液体。
4. 加酶：每孔加酶标记物 100 μ濒。
5. 温育：加好酶标记物的反应板盖好盖板膜，置 37 ℃
温育 30 min。
6. 洗板：同步骤 3。
7. 显色：每孔加显色剂 100 μ濒，振荡混匀，37 ℃避光
反应 10 min。
8. 终止：每孔加终止液 50 μ濒，振荡 10 s，充分混匀，
终止后即读数。
9. 读数：以 450 nm/ 630 nm 双波长检测，读取各孔吸
光度值（OD 值）。充分混匀，终止后即读数。

【注意事项】
1.请在使用试剂盒之前，仔细阅读说明书。
2．请不要使用过期的试剂盒组分，不要将不同批次的
组分混合使用。
3．本试剂盒应按含有传染性材料对待，试验废弃物应
经 121 ℃高压蒸汽灭菌 30 min，或用 5.0 g/L 次氯酸钠
等消毒剂处理 30 min 后废弃。
4．未用完的微孔板须放回有干燥剂的铝箔袋并密封
2 ℃-8 ℃保存。未用完的液体试剂应盖好瓶盖，与其
它配套组份放入试剂盒中于 2 ℃-8 ℃避光保存。
5．应用微量移液器加入样本及试剂，并经常校对其准
确性。
6．加洗涤液时应做到满而不溢，防止孔口有游离酶不
能洗净或各孔间的交叉污染。
7．终止液有腐蚀性，若溅到皮肤或衣物上应立即用大
量清水冲洗干净。

【储存条件及有效期】
于 2 ℃－8 ℃避光保存，防止冷冻，有效有效期 12
个月。

【生产日期及批号】
详见包装袋和外包装盒。